Essai de 2
objectifs de « relief
phase contraste » Olympus sur un microscope CK2
Comparaison
avec le
contraste d’Hoffman (et le contraste
interférenciel)
Pendant l'année
2009,
j’ai été intrigué par des
objectifs Olympus marqués d’un RP
sur Ebay et j’ai voulu en savoir plus. Je suis équipé en microscopie dans la marque Olympus. Je possède depuis longtemps un microscope BHS. Avec le développement des sites d’enchères sur internet, j’ai complété celui-ci par des accessoires et d’autres microscopes de la marque achetés d’occasion. |
J’ai
acheté en particulier aux états
unis il y a quelques années, un Olympus
inversé CK2. ![]() Je l’ai d'abord utilisé avec des objectifs A4PL, A10PL pour lesquels les anneaux de phases étaient fournis et LWD20PL (ce dernier a une bague de réglage d’épaisseur de couvre objet de 0 à 2mm). |
L’an
passé, j’ai
acheté les 2 objectifs olympus :
10x achro RP O.N. 0,25 et 40x LWDCDPlanFRP O.N.0,55 à l’origine de cet article. A noter, le 40x est prévu pour une épaisseur de couvre-objet de 1mm ! Alors que le 10X est pour un classique 0,17. |
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J’ai fabriqué des anneaux de phase correspondant pour la glissière du condenseur d’origine du CK2 mais celui-ci avait une ouverture insuffisante pour le 40X. |
Or à la
même
époque, les hasards de l'occasion m'ont fait
acheter 2 ensembles de
matériel
Nikon Diaphot pour le contraste d’Hoffman. |
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L’un a
été
associé aux objectifs pour contraste d’Hoffman : plan 10x 0,25 LWD20x 0,40 LWD40x 0,50 C'est maintenant mon matériel standart sur ce microscope inversé. |
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Le second de ces
condenseurs Nikon à 4 orifices en tourelle, sert
pour des bricolages et en
particulier pour ce relief contraste . ![]() Une brochure associée aux microscopes Olympus CK(réf. 1) m’a donné un modèle pour réaliser les anneaux adaptés aux 2 objectifs pour ce « Relief Phase Contrast (RPC) » Il
faut noter que la brochure
consacrée aux microscopes plus
récents CKX (réf.2) décrit une
technique
différente le « Relief contrast
(RC) » qui semble très proche du contraste
d’Hoffman (HMC). Est-ce
que les brevets de cette technique sont devenus exploitables par
Olympus ? |
2) résultats
des
tests Les images sont toutes rééchantillonnées pour atteindre un format de 500 pixels de large. |
1ere série (à l'échelle 0,5 = 2 photosites pour 1 pixel dans l'image): | |
Contraste de Phase "Relief phase contrast" Olympus | |
10x 40x |
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2e série (rééchantillonnée pour garder le cadre donné par le projectif NFK2,5x): | |
Phase | "Relief phase contrast" Olympus |
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A 40x, j'ai réalisé aussi des vues en contraste d'Hoffman et en contraste interférenciel mais je n'ai pas retrouvé le mème champ après changement de microscope. | |
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Contraste d'Hoffman | Contraste interférenciel |
2e sujet test: toujours avec des objectifs 40x, observations d'une goutte de liquide surnageant d'un yaourt nature pour y repèrer les bactéries responsables de la transformation du lait: lactobaciles allongés et chainettes de streptocoques, parmi des globules de graisse
Contraste de phase | Relief phase contrast |
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Contraste d'Hoffman | Contraste interférenciel |
Pour terminer, 3 exemples recadrés sur une mème ligne pour faciliter la comparaison: | ||
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Contraste de phase | Relief phase contrast | Contraste d'Hoffman |
Mème comparaison avec les bactéries du yaourt, cette fois, à l'échelle 1/2 | ||
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Contraste de phase | Relief phase contrast | Contraste d'Hoffman |
3) discussion Ces techniques sont consommatrices de lumière. Une bonne partie du cône d’éclairage est obturée et il y a de plus une plaque de phase ou un modulateur dans l’objectif. Les images en RPC ont
globalement
l’aspect du contraste de
phase mais le halo n’est présent que
d’un seul coté. Cela donne une
légère
impression de relief mais qui n’a rien à voir avec
celle du CI. Cette technique
RPC me semble
apporter peu. Elle a
pourtant été proposée
récemment (2007) sous une forme voisine par un
médecin
travaillant
en Roumanie Joerg Piper (réf. 3). Le contraste interférenciel (CI) est bien supérieur chaque fois que l’on peut l’utiliser. Le contraste de Hoffman (HMC) est intéressant avec du matériel en plastique incompatible avec le CI. C’est semble t il la solution Olympus actuelle sous le nom de « Relief contrast ». Ces techniques reliées à une illumination oblique sont toutefois intéressantes car elles n’ont qu’un faible cout et peuvent être mises en œuvre par des amateurs bricoleurs. Le
plas DIC serait
vraisemblablement
intéressant, mais il est réservé dans
le commerce
aux appareils Zeiss. Je me demande toutefois s'il ne serait pas
possible de le réaliser avec un prisme CI pour
lumière
réfléchie? c'est une nouvelle piste de
bricolage... Daniel Nardin |
Bibliographie, références internet : (1)
Olympus
relief phase contrast (2)
Olympus
relief contrast http://www.smt.zeiss.com/C12567BE0045ACF1/Contents-Frame/B14DDA7D7E2CA1D9C1256FB6002A5EA1 (5) Zeiss PlasDIC http://www.zeiss.de/C12567BE00472A5C/EmbedTitelIntern/Article-PlasDic_e/$File/GIT_Arcticle.pdf |
Faites moi part de vos réactions.... Daniel Nardin | ![]() |
Dernière mise à jour: samedi 16 janvier 2010
une version anglaise de ce texte est parue dans le journal en ligne de microscopie anglais miscape en janvier 2010